Loading…

Bisnis Online Modal 10ribu Hasil Jutaan Klik DISINI

Bagaimana Teknik Transformasi Gen dengan Perantara Agrobacterium sp. ??

Teknik transformasi gen ke dalam tanaman didasari oleh penemuan bakteri tanah Agrobacterium tumefaciens yang merupakan fitopatogen tanah yang menyebabkan penyakit crown gall dalam jaringan luka pada berbagai macam tanaman dikotil dan mempunyai kemampuan untuk memindahkan DNA ke dalam sel tanaman.

tg

Mekanisme infeksi Agrobacterium ke dalam sel tanaman yaitu terdiri atas tiga tahap :

  1. Pengenalan Agrobacterium dengan molekul sinyal yang dihasilkan oleh sel tanaman terluka, kemudian secara kemotaksis Agrobacterium akan bergerak dan menempel pada sel tanaman.
  2. Gen-gen vir pada plasmid Ti merespon molekul sinyal yang dihasilkan oleh sel tanaman dan selanjutnya menginduksi ekspresi gen-gen vir umtuk memotong rantai tunggal T-DNA dan memindahkan nya ke dalam inti sel tanaman.
  3. T-DNA teritegrasi ke dalam genom tanaman dan gen-gen pada T-DNA diekspresikan dalam sel tanaman.

Pada dasarnya Agrobacterium memberikan respon kemotaksis terhadap senyawa fenol yang dilepaskan oleh jaringan tanaman yang terluka dan bergerak menurut gradien konsentrasi menuju sel yang terluka. Respon kemotaksis merupakan ekspresi konstitutif dari gen-gen  kromosomal Agrobacterium, yaitu chvA, chvB, pscA, dan att. Gen chvA dan chvB mempunyai fungsi yang ekuivalen dengan gen ndvA dan ndvB pada Rhizobium.

Proses pemindahan T-DNA dikode oleh operon virB yang terdiri dari 11 gen. Masing-masing gen kecuali virB1, berperan pada proses terbentuknya tumor. Protein virB menunjukkan aktivitas ATPase dan diduga digunakan sebagai sumber energi untuk melepaskan subunit protein lain untuk keperluan transpor T-DNA. Sekarang telah diketahui bahwa protein VirB dapat membentuk pili konjugatif dan VirB2 menjadi subunit mayor dari pili-pili tersebut. Jembatan berupa pili yang dibentuk oleh VirB memungkinkan T-DNA-VirD2 dipindahkan ke dalam sitoplasma sel tanaman. Di dalam sitoplasma sel tanaman kompleks T-DNA VirD2 dibungkus oleh protein VirE2 yang berperan melindungi T-DNA dari degradasi yang disebabkan oleh enzim-enzim nuklease tanaman.

Kompleks T-DNA-VirD2 dan protein VirE yang telah berada di dalam sitoplasma sel tanaman kemudian masuk ke dalam inti sel tanaman. I dalam inti sel T-DNA diintegrasikan ke dalam genom tanaman dengan cara illegitimate recombination, suatu mekanisme bergabungnya dua molekul DNA yang tidak mempunyai homologi secara luas.

sekian artikel hari ini, selamat membaca dan semoga bermanfaat ^;^

salam rita elfianis

Ritaelfianis.com - Berbagi Ilmu dan Pengalaman © 2017 rita test